17 de diciembre de 2021

Elimina ficheros borrados del historial de git

Hola,

cuando trabajas sobre repositorios GitHub, como los de nuestro grupo, te puede pasar que en un momento dado agregas mediante commit ficheros de gran tamaño que finalmente no necesitas. Aunque luego los elimines con git rm esos ficheros quedan para siempre en la historia del repo y pueden hacer que clonarlo sea más pesado de lo que realmente necesitas. En esta entrada muestro una manera de eliminar este tipo de ficheros que a nosotros nos ha funcionado bien, basándonos en esta documentación.

1) Para empezar debes obtener la lista de ficheros y su tamaño del historial, deberás obtener el valor de $hash en cada caso:

ls  .git/objects/pack/pack-* 
#set hash=
git verify-pack -v  .git/objects/pack/pack-${hash}.idx | \
    sort -k 3 -n > packs

2) A continuación debes obtener los nombres y paths de esos ficheros:

perl -lane 'system("git rev-list --objects --all | \
    grep $F[0]")' packs > packs.log

3) Finalmente debes revisar packs.log y elegir qué ficheros o directorios quieres eliminar del historial. Debes asegurarte de que ya no los necesitas, porque después ya no podrás recuperarlos. Puede ser buena idea hacer una copia/fork del repositorio por seguridad.

4) Para eliminar, por ejemplo, una carpeta y su contenido, se hace así:

git filter-branch -f --index-filter \
    'git rm --cached --ignore-unmatch carpeta/*' \
    --tag-name-filter cat -- --all

5) Finalmente, para propagar estos cambios al repositorio remoto alojado en GitHub, se haría así:

git push origin --force --all

En posteriores clonados el repositorio será ya de menor tamaño.

Hasta pronto,

Bruno


15 de diciembre de 2021

CRISPR con lego duplo y DeepMind

Hola,

hoy comparto este vídeo donde Helena González Burón explica en el programa Órbita Laika el fundamento de la edición genética con CRISPR/Cas9 (del que habíamos hablado en el blog y en estos apuntes) y las enormes posibilidades y los dilemas éticos que nos presenta:

En el mismo programa Alfonso Valencia explica en términos sencillos lo que ha significado Alphafold2, del que ya hemos hablado recientemente aquí, podéis verlo a partir del minuto 40 en https://www.rtve.es/play/videos/orbita-laika/made-in-spain/6234612

Hasta pronto,

Bruno



12 de noviembre de 2021

Barleymap MorexV3 2021 release

Barleymap (https://floresta.eead.csic.es/barleymap), a Web tool for mapping the position of genetic markers along the physical and genetic maps of the barley genome, has been updated and now it supports the Morex V3 genome.

Previous maps, including the IBSC Barley Physical Map,the POPSEQ map and the 2017 Morex Genome, are still available linked to their mapped datasets. The current version adds to these the recently released MorexV3 genome, as taken from the INSDC archives (GCA_904849725.1) and Ensembl Plants, with slightly modified chromosome names for convenience:

>chr1H_LR890096.1
>chr2H_LR890097.1
>chr3H_LR890098.1
>chr4H_LR890099.1
>chr5H_LR890100.1
>chr6H_LR890101.1
>chr7H_LR890102.1
 

The unplaced contigs have unchanged names such as:

>CAJHDD010000001.1

The following new datasets are available for MorexV3:

  • PGSB genes: 35,826 HC and 45,849 LC genes (e.g.: HORVU.MOREX.r3.1HG0000030).
  • BaRT 1.0 gene models: 45,619 genes (e.g.: BART1_0-u00002) lifted-over with litfoff
  • NCBI Entrez CDS: 292 sequences clustered with GET_HOMOLOGUES-EST
  • Illumina 50K markers: 43,078 sequences with positions provided by JHI
  • centromeric regions
  • The server now works through a secure HTTPS connection using a Let's Encrypt certificate. The web code and the standalone version are available at https://github.com/Cantalapiedra/barleymap_web and https://github.com/Cantalapiedra/barleymap respectively.


     Table. Sample output of "Align" search with dataset features decorating the region of interest. Note that by default gmap and BLASTN are used as alignment engines, supporting the alignment of genomic sequences and transcripts. Read more at https://link.springer.com/article/10.1007/s11032-015-0253-1


    Please get in touch at compbio@eead.csic.es if you find anything broken,
    Bruno

    22 de octubre de 2021

    instalación de Grid Engine en servidor multi-core Debian

    Hola,

    esta es mi primera entrada tras volver a la EEAD-CSIC.

    Si hace unos años explicaba en este blog cómo instalar el gestor de colas de cálculo gridengine en un servidor  Ubuntu, esta semana lo actualizo para un servidor multicore con Debian 11:

    Instalación de los diferentes componentes gridengine en la misma máquina:

       sudo apt install gridengine-master gridengine-qmon gridengine-exec

    Si tuvieras que empezar de cero puedes hacerlo con:

        sudo apt purge gridengine-common
        sudo rm -rf /var/spool/gridengine/spooldb/sge
        sudo apt install gridengine-master gridengine-qmon
    gridengine-exec

    Tras leer esto edité el fichero /etc/hosts así:

       127.0.0.1 localhost.localdomain localhost
       127.0.1.1 master master
       121.xxx.yyy.zzz myhost
     

    Ojo que la instalación crea el usuario sgeadmin. Para que tu propio usuario tenga privilegios de administración, crear y configurar una cola llamada all.q deberás hacer los siguiente:  

        sudo -u sgeadmin qconf -am myuser

        # and to a userlist:
        qconf -au myuser users

       # Add a submission host:
       qconf -as myhost

       # Add an execution host, you will be prompted for information about the execution host
       qconf -ae
     
       # Add a new host group:
       qconf -ahgrp @allhosts

       # Add the exec host to the @allhosts list:
       qconf -aattr hostgroup hostlist myhost @allhosts

       # Add and configure queue, set the slots to CPU/cores, check parallel env (pe_list)
       qconf -aq all.q

       # Add the host group to the queue:
       qconf -aattr queue hostlist @allhosts  all.q

       # Allocate slots in this queue:
       qconf -aattr queue slots "[myhost=12]" all.q


    Con esto estaría, y puedes comprobarlo con qstat -f o lanzando un trabajo con qsub

    Con los siguientes comandos puedes reiniciar los respectivos servicios en Debian:

       sudo systemctl restart gridengine-master.service
       sudo systemctl restart gridengine-exec.service

    Hasta pronto,

    Bruno

    15 de septiembre de 2021

    Cortar secuencias desde un fichero GFF y un FASTA del genoma

    Hola,

    hoy cuento cómo cortar subsecuencias de un genoma correspondientes a elementos anotados en un fichero GFF asociado, que tienen este aspecto, con columnas separadas por tabuladores. A diferencia del formato BED, las coordinadas aquí empiezan a contar en 1:

    1  proveedor  gene  16399  20144  .  +  .  ID=500;...
    1  proveedor  mRNA  16399  20144  .  +  .  ID=500-01;Parent=500;...
    1  proveedor  exon  16399  16976  .  +  .  Parent=500-01;Name=500-01-E1;...
    1  proveedor  CDS   16599  16976  .  +  0  ID=CDS:500-01;Parent=500-01;...
    1  proveedor  exon  17383  17474  .  +  .  Parent=500-01;Name=O500-01-E2;...
    1  proveedor  CDS   17383  17474  .  +  0  ID=CDS:500-01;Parent=500-01;...
    ...
    

    Como se puede ver, cada gen es un intervalo dentro de un cromosoma o contig. En este ejemplo, adaptado de Ensembl Plants, el gen con identificador 500 está en el segmento 16399-20144 del cromosoma 1 en la hebra directa (+).

    Para cortar la secuencia de los genes en un fichero GFF podemos hacer lo siguiente, con ayuda de bedtools getfasta, que deberás instalar previamente. Los identificadores de cromosomas/contigs deben coincidir en ambos ficheros:

    # por acortar las URLs
    ENSEMBL="http://ftp.ebi.ac.uk/ensemblgenomes/pub/release-51/plants"
    
    # descargar fichero FASTA del genoma, o del chr en este caso
    wget ${ENSEMBL}/fasta/oryza_sativa/dna/Oryza_sativa.IRGSP-1.0.dna.chromosome.1.fa.gz .
    gunzip Oryza_sativa.IRGSP-1.0.dna.chromosome.1.fa.gz
    
    # descargar y descomprimir fichero GFF
    wget ${ENSEMBL}/gff3/oryza_sativa/Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gff3.gz .
    gunzip Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gff3.gz
    
    # extraer solamente los elementos de tipo "gene"
    perl -lane 'print if($F[2] eq "gene")' Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gff3 > \ 
        Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gene.gff3
    
    # cortar los genes y guardarlos en un fichero FASTA
    bedtools getfasta -fi Oryza_sativa.IRGSP-1.0.dna.chromosome.1.fa \
        -bed Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gene.gff3 \
        -fo Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gene.fa
    

    Si necesitamos cortar las secuencias codificantes (CDS) necesitamos instalar gffread desde https://github.com/gpertea/gffread (mirar artículo aquí). Con este programa puedes extraer los CDS como nucleótidos o aminoácidos, pero tiene muchas más opciones:

    # secuencia de exones codificantes concatenados, una por tránscrito/mRNA
    /path/to/gffread-0.12.7.Linux_x86_64/gffread -x cds.fna \
        -g Oryza_sativa.IRGSP-1.0.dna.chromosome.1.fa \
        Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gff3
    
    # traducción de exones codificantes concatenados, una por tránscrito/mRNA
    /path/to/gffread-0.12.7.Linux_x86_64/gffread -y cds.faa \
        -g Oryza_sativa.IRGSP-1.0.dna.chromosome.1.fa \
        Oryza_sativa.IRGSP-1.0.51.chromosome.1.gff3
    

    Hasta pronto,

    Bruno